Koti > Blogi > Teollisuuden uutisia

Mitkä ovat ELISA-sarjan toiminnot?

2022-12-23

ELISA-sarja perustuu antigeenin tai vasta-aineen kiinteään faasiin ja antigeenin tai vasta-aineen entsyymileimaukseen. Kiinteän kantajan pintaan sitoutunut antigeeni tai vasta-aine säilyttää edelleen immunologisen aktiivisuutensa, ja entsyymileimattu antigeeni tai vasta-aine säilyttää sekä immunologisen aktiivisuutensa että entsyymiaktiivisuutensa. Määrityshetkellä testattava näyte (jossa vasta-aine tai antigeeni mitataan) reagoi kiinteän kantajan pinnalla olevan antigeenin tai vasta-aineen kanssa. Kiinteän kantajan päälle muodostunut antigeeni-vasta-ainekompleksi erotetaan muista nesteen aineista pesemällä.

Lisätään entsyymileimattuja antigeenejä tai vasta-aineita, jotka myös sitoutuvat kiinteään kantajaan reaktion kautta. Tällä hetkellä kiinteässä faasissa olevan entsyymin määrä on suhteessa näytteessä olevan aineen määrään. Entsyymireaktion substraatin lisäämisen jälkeen entsyymi katalysoi substraatin muuttumaan värillisiksi tuotteiksi. Tuotteen määrä on suoraan verrannollinen testattavan aineen määrään näytteessä, joten laadullinen tai kvantitatiivinen analyysi voidaan tehdä värin syvyyden mukaan.

Entsyymien korkea katalyyttinen tehokkuus vahvistaa epäsuorasti immuunivasteen tuloksia, mikä tekee määrityksestä erittäin herkän. ELISA:ta voidaan käyttää antigeenien määrittämiseen, mutta sitä voidaan käyttää myös vasta-aineiden määrittämiseen.

ELISA-sarjan perusperiaatteet
Se käyttää antigeenin ja vasta-aineen spesifistä reaktiota liittääkseen kohteen entsyymiin ja tuottaa sitten värireaktion entsyymin ja substraatin välillä kvantitatiivista määritystä varten. Mittauskohde voi olla vasta-aine tai antigeeni.

Tässä määritysmenetelmässä tarvitaan kolme reagenssia:
â  Kiinteän faasin antigeeni tai vasta-aine (immuuniadsorbentti)
â¡ Entsyymileimattu antigeeni tai vasta-aine (markkeri)
⢠entsyymitoiminnan substraatti (värinkehitysaine)

Mittauksessa antigeeni (vasta-aine) sitoutuu ensin kiinteään kantajaan, mutta säilyttää silti immuuniaktiivisuutensa, ja sitten lisätään vasta-aineen (antigeenin) ja entsyymin konjugaatti (markkeri), joka säilyttää edelleen alkuperäisen immuuniaktiivisuutensa ja entsyyminsä. toiminta. Kun konjugaatti reagoi kiinteällä kantajalla olevan antigeenin (vasta-aineen) kanssa, entsyymin vastaava substraatti lisätään. Eli katalyyttinen hydrolyysi tai REDOX-reaktio ja väri.

Sen tuottama värisävy on verrannollinen mitattavan antigeenin (vasta-aineen) määrään. Tämä värillinen tuote voidaan havaita paljaalla silmällä, optisella mikroskoopilla, elektronimikroskoopilla, voidaan mitata myös spektrofotometrillä (entsyymimerkintälaite). Menetelmä on yksinkertainen, kätevä, nopea ja tarkka.

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept