> Blogi > Teollisuuden uutisia

Miksi soluviljelmä hajottaa punasolut ensin?

2022-12-23

Perusjohdanto
Erytrosyyttilysaatti on yksi yksinkertaisimmista ja helpoimmista menetelmistä poistaa punasoluja, toisin sanoen jakaa punasoluja lysaatilla, joka ei vahingoita tumallisia soluja ja voi poistaa punasoluja kokonaan. Lysaatin pilkkominen on lievä punasolujen poistomenetelmä, jota käytetään pääasiassa entsyymidigestiolla dispergoituneiden kudossolujen erottamiseen ja puhdistamiseen, lymfosyyttien erottamiseen ja puhdistamiseen sekä punasolujen poistamiseen kudosproteiinin ja nukleiinin kokeissa. happouutto. Punasolujen lysaatilla saadut kudossolut eivät sisällä punasoluja, ja niitä voidaan edelleen käyttää primääriviljelyyn, solufuusioon, virtaussytometriaan, nukleiinihapon ja proteiinin erottamiseen ja uuttamiseen jne.

Käyttöohjeet
Kudossolunäyte
1. Tuoreet kudokset pilkottiin haima/entsyymi tai kollagenaasilla ja dispergoitiin yksisolususpensioon, ja supernatantti heitettiin pois sentrifugoimalla.

2. Ota ELS-lysaatti jääkaapista 4 °C:ssa, lisää ELS-lysaattia solusakkaan suhteessa 1:3-5 (lisää 3-5 ml lysaattia 1 ml:aan tiivistettyä solua), puhalla varovasti ja sekoita.

3. Sentrifugoi nopeudella 800-1000 rpm 5-8 minuuttia ja hävitä ylempi punainen kirkas neste.

4. Saostunut osa kerättiin ja sentrifugoitiin Hankin liuoksella tai seerumittomalla viljelyliuoksella 2-3 kertaa.

5, jos halkeilu ei ole täydellinen/täydellinen, vaiheet 2 ja 3 voidaan toistaa.

6. Uudelleensuspendoi solut myöhempiä kokeita varten; Jos RNA uutetaan, on parasta tehdä se liuoksessa, joka on valmistettu vaiheesta 4 käyttäen DEPC-vettä

Punasoluilla on hyvin lyhyt elinkaari, vain 120 päivää, mutta ne tuottavat verta erittäin nopeasti, ja tässä tapauksessa ne ovat erityisen kykeneviä solujen jakautumiseen, ja ne ovat nopeimmin jakautuvia soluja, joten tämä solu on erittäin arvokas, joten se on erittäin hyödyllinen soluviljelyssä. Se on hyvin yksinkertainen, siinä ei ole organelleja, vain solukalvoja ja proteiineja.

Edellinen:Mitkä ovat ELISA-sarjan toiminnot?

Seuraava:Reagenssivaatimukset ja liuospitoisuuden perusesitys.