Oikean viljelyvälineen valinta on ratkaisevan tärkeää optimaalisen solukasvun ja koetulosten varmistamiseksi. Soluviljelyastioita valittaessa on tärkeää ottaa huomioon sellaiset tekijät kuin solutyyppi, viljelmäsi erityinen tarkoitus, viljelyn mittakaava, viljelyalustan tyyppi, suonten materiaalit ja koko, pintakäsittelyt, kannet oikeaa varten. kaasunvaihtoa ja niiden yhteensopivuutta laboratoriolaitteiden kanssa.
Tässä ovat tärkeimmät tekijät, jotka on otettava huomioon valittaessa oikeaa soluviljelyastiaa
1. Valitse soluviljelyastia solutyypin perusteella
Kiinnittyneet solut
Nämä solut tarvitsevat pinnan kiinnittymään ja leviämään. Kiinnittyneitä soluja varten tarvitset suonet, joiden pinta-ala tarjoaa tarpeeksi tilaa solujen kiinnittymiselle ja kasvulle.
Esimerkkejä Kudosviljelmällä käsitellyt pullot, petrimaljat ja monikuoppalevyt.
Suspensiosolut
Nämä solut kasvavat kelluvasti väliaineessa, joten pintaa ei oteta huomioon.
Esimerkkejä
Kudosviljelypullot, kehruupullot tai bioreaktorit suuria suspensioviljelmiä varten.
2. Valitse soluviljelyastia koon (tilavuuskapasiteetti) perusteella.
Pienimuotoiset kulttuurit
Pienimuotoisiin kokeisiin tai korkean suorituskyvyn seulomiseen pienemmät suonet ovat ihanteellisia.
Esimerkkejä Monikuoppaiset levyt (6, 24, 96 solun viljelylevyt),
petrimaljojatai T25-pulloja.
Laajamittaiset kulttuurit
Jos sinun on kasvatettava suuria määriä soluja, suuremmat astiat tai bioreaktorit ovat parempia.
Esimerkit T75- ja T175-soluviljelypullot, bioreaktorit tai spinner-pullot suspensiosoluviljelmille.
3. Valitse soluviljelyastia pintakäsittelyn perusteella
Kudosviljelyllä käsitellyt pinnat
Suonet esikäsitellään solujen kiinnittymisen edistämiseksi, mikä tekee niistä sopivia kiinnittyville solutyypeille. Nämä on yleensä päällystetty aineilla, kuten kollageenilla, fibronektiinillä tai muilla solunulkoisen matriisin komponenteilla.
Käsittelemättömät pinnat
Ihanteellinen suspensioviljelmille tai kun solujen ei tarvitse tarttua pintaan. Niitä käytetään yleensä soluille, jotka kasvavat vapaasti väliaineessa.
4. Valitse soluviljelyastia materiaalin perusteella
Polystyreeni, jota käytetään yleisesti tavallisiin soluviljelysovelluksiin. Se on kirkas, mahdollistaa helpon visuaalisen tarkastuksen ja toimii hyvin sekä kiinnittyville että suspensiosoluille.
Polykarbonaattia tai polypropeenia käytetään tietyissä bioreaktorisovelluksissa ja astioissa, jotka vaativat enemmän joustavuutta tai erityisiä pintakäsittelyjä.
Lasi, jota käytetään tavanomaiseen kudosviljelmään kustannusten ja rikkoutuvuuden vuoksi, lasiastiat voivat sopia tiettyihin sovelluksiin tai laajamittaisiin viljelmiin.
Pullot
Yleisessä soluviljelyssä käytetään yleisesti T-pulloja (T25, T75, T150). Tasainen pinta tarjoaa hyvän alueen solujen kiinnittymiselle ja kasvulle. Niitä voidaan käyttää sekä kiinnittyville soluille että suspensioviljelmille, jos asianmukaiset olosuhteet säilyvät.
Petri maljat
Yleistä pienimuotoisissa viljelmissä ja havainnointia vaativissa kokeissa, kuten pesäkkeiden muodostusmäärityksissä.
Monikaivolevyt
Nämä ovat hyödyllisiä korkean suorituskyvyn seulonnassa ja pienemmissä kokeissa. Lautaset 6, 12, 24, 48,
96, tai 384 kuoppaa on saatavilla, ja ne sopivat ihanteellisesti solupohjaisiin määrityksiin, sytokiinien vapautumiseen, lääketestaukseen ja muihin korkean suorituskyvyn sovelluksiin.
Spinner Pullot
Käytetään suspensiosoluviljelmiin, erityisesti suuremmissa tilavuuksissa, joissa hallittu sekoitus on välttämätöntä solujen kasvun ylläpitämiseksi ja solujen paakkuuntumisen välttämiseksi.
Bioreaktorit
Suuren mittakaavan suspensioviljelyssä bioreaktorit mahdollistavat monimutkaisemman ympäristöolosuhteiden (esim. pH, lämpötila, hapetus) hallinnan, ja niitä käytetään suurten määrien tuotantoon, kuten biofarmaseuttisessa valmistuksessa.
6. Valitse soluviljelyastia steriiliyden ja tuuletuksen perusteella
Steriiliys
Varmista, että astia on steriili tai steriloitu kontaminaation välttämiseksi. Useimmat kaupalliset viljelyastiat ovat esisteriloituja, mutta tarkista aina pakkaus.
Ilmanvaihto
Joissakin astioissa, kuten pulloissa, on tuuletetut korkit tai suodattimet, jotka mahdollistavat ilmanvaihdon ja estävät kontaminoitumisen. Tämä on välttämätöntä viljeltäessä soluja korkean tiheyden olosuhteissa.
7. Valitse soluviljelyastia käyttömukavuuden perusteella
Autoklavoitava vs. kertakäyttöinen
Jotkut viljelyastiat voidaan autoklavoida uudelleenkäyttöä varten (esim. lasipullot, tietyt muovipullot), kun taas toiset ovat kertakäyttöisiä ja kertakäyttöisiä (esim. muoviset petrimaljat, monikuoppaiset levyt).
Käsittely ja kuljetus
Harkitse solujen siirtämisen helppoutta verisuonten välillä. Esimerkiksi monikuoppaiset levyt voivat vaatia erikoislevyjä, jotta niitä on helppo käsitellä laitteilla, kuten automaattisilla pipeteillä.
8. Valitse soluviljelyastia elatusaineen tilavuuden perusteella
Valitse astia, johon mahtuu haluttu tilavuus elatusainetta tuhlaamatta resursseja. Jos työskennellään suuren tilavuuden viljelmän kanssa, suuremmat pullot tai bioreaktorit voivat olla tarpeen, kun taas pienemmät tilavuudet sopivat soluviljelymaljoille tai -levyille.
9. Valitse soluviljelyastia kustannusnäkökohtien perusteella
Kertakäyttöiset vs. uudelleenkäytettävät
Kertakäyttöiset muoviastiat ovat kustannustehokkaita ja vähentävät kontaminaatioriskiä, mutta ne voivat olla kalliita suurissa toiminnoissa. Uudelleenkäytettävät lasiastiat ovat kalliimpia, mutta ne voidaan steriloida ja käyttää uudelleen useita kertoja, mikä tekee niistä taloudellisempia pitkäaikaisessa käytössä.
Äänenvoimakkuuden tehokkuus
Varmista, että astian koko on sopiva materiaalien hukkaan välttämiseksi, erityisesti käytettäessä kalliita kasvatusalustoja tai reagensseja.
10. Valitse soluviljelyastia erityisten sovellusvaatimusten perusteella
Kuvantaminen
Jos sinun on visualisoitava solut mikroskoopilla, valitse suonet, joissa on optisesti kirkkaat materiaalit ja sopivat mitat kuvantamisasetuksiin (esim. monikuoppaiset levyt suuren sisällön seulomiseen tai lasipohjaiset astiat elävien solujen kuvantamiseen).
Hallittu agitaatio
Suspensiosoluviljelmissä harkitse spinner-pulloja tai bioreaktoreita, jotka tarjoavat kontrolloidun sekoituksen, jotta solut pysyvät tasaisesti suspendoituina.
Johtopäätös
Oikean soluviljelyastian valinta edellyttää useiden tekijöiden tasapainottamista, mukaan lukien solutyyppi, viljelmän mittakaava, materiaalien yhteensopivuus ja erityiset kokeelliset tarpeet. Kiinnittyneet solut tarvitsevat pintoja, jotka edistävät kiinnittymistä, kun taas suspensiosolut hyötyvät suuremmista tilavuuksista ja sekoituksesta. Pienen mittakaavan työhön voi riittää monikuoppaiset levyt tai T-pullot, kun taas suuremmat viljelmät voivat vaatia spinner-pulloja tai bioreaktoreita. Varmista aina, että astiat täyttävät steriiliys- ja käsittelyvaatimukset, ja harkitse kustannustehokkuutta käyttösi perusteella.
Nämä tekijät huomioon ottaen voit valita optimaalisen suonen, joka tarjoaa oikeat olosuhteet soluviljelyllesi ja koetavoitteillesi.